徠卡 TCS SP8 STED 超高分辨率顯微鏡——納米級世界的真正本質  

納米顯微技術為亞細胞結構和動態研究帶來了相當的變化，它正成為熒光成像新的標準 (該技術榮獲 2014 年諾貝爾化學獎)。

高度整合的 STED (STimulated Emission Depletion，受激發射損耗) 系統 Leica TCS SP8 STED 3X 和 Leica TCS SP8 STED ONE 滿足日常研究的需求，并且以純光學方式快速、直觀地呈現遠遠突破衍射極限的結構細節。

X、Y 和Z 軸上的分辨率都變得可調。

徠卡 TCS SP8 STED 超高分辨率顯微鏡主要特點

您想要從 STED 成像開始您的工作？

無需投資購買儀器，即刻親見生命的奧秘。新型 Leica TCS SP8 STED ONE 592 和 STED ONE 660 納米顯微鏡以多功能創新共聚焦平臺 Leica TCS SP8 為基礎，是納米顯微技術的戰略性入門設備。Leica HyD 混合檢測器將光譜檢測和靈敏度相結合，并輔以白光激光的自由激發，使 Leica Microsystems 的 STED 納米顯微鏡成為一種靈活的工具，適用領域絕不僅止于納米顯微技術。

如果您需要盡可能多地進行多熒光團多顏色成像，Leica TCS SP8 STED 3X 允許您使用多達三條 STED 譜線，在整個可見光全光譜內進行STED成像。

增強科研實力的技術

 ● 納米顯微技術可直接運用于 x、y 和 z 軸，并且可調，為您揭示細微的結構

 ● STED WHITE 物鏡提供全光譜范圍的色差校正

 ● motCORR STED 物鏡實現深度實時圖像

 ● 多條 STED 譜線支持全可見光全光譜超高分辨率成像

 ● 門控檢測提高分辨率，改善活細胞成像性能

 ● 自動光束校準，確保穩定性和可靠性

 ● Huygens 反卷積技術，從原始數據中獲取更多信息

 ● 基于 TCS SP8 的模塊化概念，隨時升級

多色納米顯微技術

涵蓋可見光全光譜

多色標記的應用使我們對各種結構的相互關系有了更深入的了解。共定位研究通常使用 STED ONE 納米顯微鏡來完成。STED 3X 的多條 592 nm 和 660 nm STED 激光譜線以及 775 nm 脈沖激光 (分辨率可達 30 nm) 涵蓋可見光全光譜，可以獲取許多適用的熒光團。

更多顏色，成就與眾不同！

白光激光、AOBS (聲光分光器) 和可調光譜檢測器結合在一起，使您可對任何熒光團組合成像，極度靈活地執行多色實驗。

HeLa 細胞三重免疫染色 STED 圖像：綠色：NUP153-Alexa 532，紅：網格蛋白-TMR，白色：肌動蛋白-Alexa 488。

光學器件成就的納米顯微技術

STED WHITE – 絲毫無損光學器件品質

如果需要解析微小的細節，優質的光學器件是首要的關鍵前提。三個 STED WHITE 物鏡色彩校正性能良好，可確保在整個可見光譜范圍內實現理想激發覆蓋和 z 軸 STED PSF。可在592/660/775STED使用白激光作為 激發光。隨心所欲地為 STED 納米顯微技術自由選擇比以往更多的熒光團。

STED WHITE物鏡深活納米細胞

使用 STED WHITE 油浸物鏡 (HC PL APO 100x/1.40 OIL)，可輕松進行標準固定樣品成像。它可實現非常高的數值孔徑和分辨率。對于較為復雜的實驗，使用新型 STED WHITE Glycerin 物鏡 (HC PL APO 93X/1.30 GLYC motCORR) 可為您創造新的機遇。電動修正環可根據不同的蓋玻片厚度、溫度和樣品不均勻性，精確、快速調節光學物鏡。3D STED 在室溫和 37°C 下都能清晰呈現樣品體表下的細節

新！用于水介質的STED White 物鏡！

HCS PL APO 86x/1.2 W motCORR物鏡在水環境實驗中具有優良性能。電動校正環結合折射率匹配使得該物鏡是水介質成像的理想伙伴。

STED WHITE 物鏡的色差校準。灰色虛線和實線分別描繪不同景深。

門控 STED – 通往活細胞納米顯微成像的坦途

gSTED – 圖像更多，精細結構更入微

門控 STED 為備受認可的 STED CW 功能帶來實質性的擴展，能夠獲得更高的分辨率或選擇更低的激光功率。

懸浮液中活 T細胞。共聚焦和 STED 3D 重構。大投影。

特別感謝：英國牛津大學韋瑟羅爾分子醫學研究所，MRC 人類免疫學研究單位，Marco Fritsche、Mathias Clausen 和 Christian Eggeling。

使用 HyD 和白光激光實現低于 50 nm 的分辨率

Leica HyD 混合檢測器與作為脈沖激發源的白光激光搭配使用，可以僅檢測來自激發脈沖之后某一時間窗口的熒光信號。平移時間窗，使其遠離激發脈沖，可實現遠低于 50 nm 的分辨率。在相同的激光功率下，門控 STED 的分辨率比 STED CW 高 50% 以上。無需更多的 STED 光便能觀察更細微的細節，提升活細胞的成像能力。

在 STED CW 顯微鏡有效焦點上，熒光團生命周期的分配。長壽命狀態 (紅色) 處于中心區域，短壽命狀態 (藍色) 處于外圍區域。

第三維度的 STED

多條 STED 光路 

使用 TCS SP8 STED 3X 和 TCS SP8 STED ONE，儀器可提供兩條光路，產生不同的 STED 模式。STED 光可在兩條光路之間無級分配。

設計您的 PSF

您可選擇理想橫向分辨率、縱向分辨率或兩者之間的任意設置，以獲取理想的結果。超薄的光學切面為您揭示不為人知的細節。STED 3X 和 STED ONE 使您的顯微鏡分辨率在所有維度都能契合您的科學問題和樣品需要。

選擇您的分辨率

通過在兩條 STED 光路中分配光線提升分辨率：傳統渦流圓環可實現理想橫向分辨率，新型 z 軸圓環可實現理想縱向分辨率。還可針對小聚焦容積進行優化。

STED 軟件解決方案 – 對分辨率了如指掌

STED 顯微技術是快速直接的超高分辨顯微技術。使用 LAS X，您可暢享其便捷性。通過預估的有效 PSF 示意圖，可以直接在線查看對所選技術參數效果的反饋。

直觀的工作流程

通過智能 STED 向導，只需滑動三個簡單的滑塊，便可控制儀器。借助有效 PSF 示意圖，在衍射極限的情況下，您可定義您所需的超高分辨率等級。為了得到理想結果，向導將調節所有必要的設置，如 STED 激光強度、像素尺寸、Z 步進、針孔、門控設置和圖像平均次數。

智能 STED 工作流程：1. 使用 STED 和 3D 滑塊調節所需的有效 PSF。2. 使用劑量滑塊在信噪比和圖像數量之間選擇。

3. 確定共聚焦實時掃描時的感興趣區域，并相應調節激發光。4. 采集單幅或自動序列圖像，獲得超高分辨率數據。