徠卡熒光顯微鏡的正確使用

徠卡熒光顯微鏡需要在爬宜內進行觀氏否則圍有其他光線而影響觀察的正確性。

徠卡熒光顯微鏡的產生是由于某些物質核輻射線波長較短的光線照射后即發出波長較長的可見兒有的物質或細胞本身并不產生熒光，但在有機3E光色紫溴潤下即能產生榮光。

徠卡熒光顯微鏡觀察方法可分為兩種：

（1）陸視場照明法

將紫外光照明器前面的全部濾光片用上，這時汞氣燈所發射的全部可見光被濾九而蹬過的紫外九其波長約為3000人一s600A此乃正常的熒光觀察法。

（2）深藍視場照明法

徠卡熒光顯微鏡將靠近紫外光照明器光源的兩組濾光片用2，這時把汞氣燈發生的光波限制征一定的波長內（3000A一4500A），視場內有深藍色的背景出現，是為求得足夠強度的紫外光照明標本。

徠卡熒光顯微鏡為了使照明標本的紫外光線不進入觀察看的眼睛，以免損壞眼睛和影響熒光觀察的正確性起見在物鎬與目鏡之間安裝有兩組濾光片，并可配合組成各種顏色，使用時極為方便．

在使用徠卡熒光顯微鏡叭皮把定距尺安裝在紫外光照明器與顯微鏡之間，以保持照明器的正確位置。

徠卡熒光顯微鏡也可安裝白識燈照明器，燈泡為6Y15w之白識燈，其插頭皮與變壓器上白熾燈頭插座相連接。

徠卡顯微鏡作熒光觀察時，標本所用的載物比采用石英裁物小當無石英載物片時，亦可采用普通玻璃裁物片，因普通玻璃對較長波段之紫外光吸收并不多。

徠卡熒光顯微鏡的高壓汞氣燈一經熄滅，要等到汞氣燈冷6g后才可重新發光因而在進行連續觀察分橋時，不應中途滅燈，以免浪費時間。策外光照明器必須通過變壓33才能使用。’

徠卡熒光顯微鏡的光源裝置

光源裝置是徠卡熒光顯微鏡的主要部分，它的作用是提供足夠強度的激發光，現代俊光顯微鏡基本上采用超高壓汞奴光源裝置，它由電源箱印燈空兩部分組成。超高壓汞燈的發光，是電極間放電使水銀分子在不斷解離和還原過程中發出量子的結果，徠卡熒光顯微鏡具有固定的光譜曲線，在紫外和紫藍部分都有很強的發射，足以激發各類熒光物質，這是它被普通采用作為熒光顯微鏡光源的主要原因。一般都采用200W的超高壓汞燈作光涌，其使用平均壽命約200小時左右。

徠卡熒光顯微鏡由于超高壓汞燈的電壓很高（紉EoDOV），另外貿外線也很酞因A，燈泡裝置在燈室中的后5，以肪傷害眼賄．

徠卡熒光顯微鏡城色系統

濾色系統是徠卡熒光顯微鏡的重要部分，它由激發濾片（*相片）和抑制濾片（第二濾只）所組成。前者提供一定波長范目的激發光，后者提供相應波長范圍的熒光。其蹈片通常用有色玻璃組成。其型號各國均不相同。

徠卡熒光顯微鏡激發濾片根據光源和熒光色突的特點，可分為露外光激發濾片，紫氏光激發濾片和紫外藍光激發濾片。

徠卡熒光顯微鏡援外激發濾序可隨波長400微米以下的紫外光透過，400毫微米以上的可見光擋住。常用型號為ZWBl或zwB3，外加一塊BG38以除去ZWBl或zWE3的紅色尾波。

徠卡熒光顯微鏡紫族色激發財挪服波長350一390微米范圍內的光透過。常用型號為QB24。紫外政光激發濾片可控波長300一450微米范圍內的光逮過。常用型號為ZE2或zB3，外加HG38，韋·些熒光色素，其zui大吸收峰在500微米以上酌．也可以用論綠濾J4BG7激發。近輕改隨著金屬鍍膜陵木的發展，巴開始采用選擇性更強的金屬膜干涉濾片，由于它調對性強，波長適當，因而激發效果比有色玻璃片更好。

徠卡熒光顯微鏡所需激發濾片的厚度，主要根據所用顯微木激發方式而定，暗場熒光顯微術要求激發濾片薄一些，明場時則要求厚一生因為使用暗場時，激發光不理按進入物鏡，另外還得考慮標本情況和目的性，基本原則是以獲得昆明亮的熒光相的背景襯托為準。

徠卡熒光顯微鏡抑制濾片的選擇，主要根據激發濾只而定。其原則是以*吸收激發光為晚即與激發明計重疊應該；下透過任何可見光（*互補）以保護眼睛不受紫外光的刺激和損害。為與激發濾片相對應，抑制濾片也可分為：紫外光抑制濾片、紫藍光抑制濾片和紫外驗光抑制濾址。

徠卡熒光顯微鏡的本體

顯微鏡是任何徠卡熒光顯微鏡的基本工具，它的主要作用是使被撿標本圖象得到不同程度的放大。在熒光顯微木中，熒光光源裝置是提供一定波長的激發光使被校標本受激發射熒光，再通過顯微鏡的物鏡，B鏡系統使熒光圖象放大以供觀察，因此，一般來說，任何顯微鏡都可以用于熒企顯微術。不玖由于熒光顯檄鏡所放大的象是熒光圖象，必須根據熒光產生和表現的特點，因此在使用方法—L略有講災。

一船徠卡熒光顯微鏡的光學元件，大都果用普通光學玻璃制造。它們對30ooA以上的長波紫外線和可見光能很好地透過，因此完滿足——殷熒光顯微術的要求，只是在個別情況下，當標本必須用短波紫外線激發時，才需用石英玻璃或特種玻璃的聚光鏡和反射執這時殘破片也必須是特制晰但在進射光顯檄術時，物鏡和目鏡只需用普通光學玻璃即可。如在反射光顯微術時，則物鏡必須能透過紫外光的。現就熒光顯微木的特點，介紹一下熒光顯微境備部分的性能特點。

備注：徠卡熒光顯微鏡的使用方法部分新聞由http://www.cnnoptics.com/，編輯上傳。