徠卡冰凍切片機 (frozensection)是一種在低溫條件下使組織快速冷卻到必定硬度,然后進行切片的辦法。因其制造進程較白臘切片方便、簡便,而多應用于手術中的快速病理確診。制造一張出色的冰凍切片,確保切片質量的一起,又要前進手術中快速病理確診的準確率,那么這跟對冰凍切片機的知道和選擇有很大關系。下面就常用的徠卡冰凍切片機 的分類、原理做簡略的拾掇和概括。
徠卡冰凍切片機首要分為兩大類,即冰凍切片機(FreezingMierotome)和低溫恒冷冰凍切片機(Cryostat)。
?
1.冰凍切片機
一般是由輪轉式切片機或推拉式切片機加上致冷設備而成的。常用的致冷設備有二氧化碳冷凍設備和半導體冷凍設備。
(1)二氧化碳致冷器的基本原理是選用二氧化碳氣體凍住組織。切片機往往與一個二氧化碳鋼瓶相連,使氣體能通向切片機的載物臺,有的還可通向切片刀。切片時打開二氧化碳氣門,氣體即通過管道噴出。由于許多吸熱,載物臺(又稱冷凝臺)及其上的組織敏捷冷卻,切片刀的溫度也相應下降,即可切片。組織和切片刀的溫度可通過恰當控制開關,改動二氧化碳氣流的巨細進行調理。
(2)半導體致冷器的基本原理是運用Peltier效應。Peltier觀察到當直流電通過兩種不同的金屬時,即在這兩種金屬接壤的一個面發生熱量,另一面損失熱量。根據這一原理做成熱電微型元件,即將多個溫差電偶按必定的順序排列起來,構成一個較大的界面,當直流電通過期,電偶的一端發熱,另一端致冷。將這種設備用于冰凍切片,可將溫度比較精確地控制到-30℃士0.1℃,并可長久保持穩定。電偶吸熱端和放熱端之溫差在必定規劃內與電流的巨細成正比,電流越大,溫差就越大。但電流超過必定規劃后,溫差反而下降。大溫差時通過電偶的電流即為“較佳電流”,如果有循環水等散熱辦法將放熱端予以冷卻,則吸熱端的溫度將隨之下降,半導體冰凍切片就是運用電偶的吸熱端冷卻組織,使之硬化而制造切片。
上述切片機都置于室溫內進行切片,所以都具必定的局限性,如切片往往較厚,并且易與刀粘著,需要恰當嫻熟的技巧才干取得滿意的切片。
2.低溫恒冷冰凍切片機
50年代中期,開端有人將低溫恒冷冰凍切片機用于病理確診,使冰凍切片的質量和速度都有了很大的前進。
低溫恒冷冰凍切片機實際上就是將通過改進的切片機置于一個冷凍室內,與電冰箱致冷原理相同,運用壓縮機通過氟利昂循環致冷。切片機的操作大部分在冷凍室外進行。現在常用的切片機為輪轉式的。低溫恒冷切片機又分為全封閉式和頂部開放式。頂部開放式的切片機上部有一大的滑動玻璃窗,通過此窗放入組織,調整切片機,進行切片。本機可以自在選擇溫度、切片厚度,制片敏捷,可以接連切片,染片質量可與常規白臘切片比美,并且組織內的生物活性物質保存出色,適用于組織化學、免疫熒光和免疫組織化學等染色。制片溫度選擇可按組織類型及切片厚度而定,大多數組織以-15℃~-20℃為宜,脂肪組織所需溫度更低,可加用干冰冷凍。