顯微鏡的zui大數值孔徑可達1.5υm左右，在這種情形下：

即在這種顯微鏡里，仍可分辨的兩點間zui短距離差不多等于所用光波波長的1／3。假定綠光的光波的波長λ＝5.46xl0ˉ5cm，那么顯微鏡能分辨的zui短距離為：

則這臺顯微鏡的zui高分辨距離也超不過0.182υm。向眼在明視距離（250M）能分辨的兩點之間zui短距離為0.1mm，約為上述d值的560倍，因此1臺光學顯微鏡的放大率有1000倍也就足夠了。這是因為光的本性及光的繞射現象就限制了顯微鏡的放大極限。凡是光波超過微粒直徑的2倍時，光線就很方便地繞過微粒而繼續前進，所以普通干燥系顯微鏡的zui大鑒別率只能達到光源波長的1／2，直徑小到0.2υm的微粒就無法被光學顯微鏡發覺。雖然后來應用浸潤系方法，如油鏡，提高了折射率，其鑒別率也只不過能提高到光源波長的1／3而已。而且還要用的透鏡才能達到。

2．顯微鏡的放大率

對于有一定大小的細節，除應該用適當的數值孔徑的物鏡而外，整個顯微鏡也應該有適當的放大倍數與之相適應，才能看清細節，這種放大倍率稱之為有效放大率。這是實際下作應該考慮的問題，每個物鏡都有它的有效放大率。

在使用生物顯微鏡過程中，每個物鏡都配多大的倍數的目鏡，應該特別注意。一般而言，顯微鏡的zui高放大倍數不得超過所使用物鏡鏡口率（NA）的1000倍，否則即產生畸變而失真。例如，其物鏡的放大倍數為lO×，為0.25，則0.25x1000＝250，即與這個物鏡配合使用的接目鏡其放大倍數不應超過25倍，因為25×10＝250。與油浸系配合的目鏡放大倍數應更小些，例如，有一個l00x，N•A為1．4，則1．4x1000＝1400，即接目鏡的放大倍數不應超過14×，因為14×100＝1400。通常總是低倍物鏡配合高倍目鏡，高倍物鏡配合低倍目鏡，便是這個道理。

目前生物顯微鏡一般油浸物鏡NA＝1.25或1.3左右，所以，一般放大1250或1350倍已經夠了，而zui大川為1．5，所以國家規定顯微鏡的zui高倍數為1250倍，而通常顯微鏡zui高倍咖良少超過1500倍。如果1臺顯微鏡zui高放大2500倍，實際上放大1000倍時有鑒別率。放大倍數太大，也是無效的．因為放大到一定限度后，把像再放大也不會使我們看到更小些的細節，如果勉強放大，只會使像變得模糊反而影響清晰。也有超過1500倍的，其實也就是目鏡倍數大了一些，這是為了照相或投影之用。

4．幾個有關的概念

（1）顯微鏡的機械管長。是指從任何——個接物鏡的接合螺絲抵肩換器吻合處起，到接口鏡筒上緣止的這一段距離而言為機械管長。

如有抽筒則指還未被拉起的長度．抽筒可從150mm拉到250mm。在干燥系中是使用顯微鏡岡有的鏡筒長度或抑筒未被拉起的長度c油浸系則須拉抽簡拉到170M，當觀察不透明的物體時，便應拉到190mm或250mm，這也是機械管長。現在一般無抽筒顯微鏡或有抽筒而未被拉起時．多固定為160mm。

（2）生物顯微鏡的光學管長。是指從接物鏡的上焦面起，到接目鏡下主焦面止，這段距離而言為光學管長。

它的簡單測定方法：從接物鏡上組透鏡的亡面量到接目鏡的光欄環隔為止，約得1個近似數值。在干燥系情況下，多為140mm，也可小至128mm以下，油浸系則可高到180mm以上。光學管長關系著次級放大倍數，非常重要。

（3）顯微鏡的操作距離。是指接物鏡下端與蓋片之間的距離而言，為操作距離。

一般鑒別率小者則操作距離大，反之則小。因為操作距離大，鏡口角一定小，于是鏡口率也小，即吸收光量的能力弱，所以鑒別率就受到限制。反之操作距離小，則接物鏡與蓋片越接近，則鏡口角就大，而吸收光量也相應增大，鑒別率自然會增強。

一般顯微鏡的操作距離為16—0.65mm，但也有長至55mm而短至O.5mm的。

（4）明視距離。出于眼睛的調節作用，所看清楚的zui遠和zui近的兩點，分別叫遠點和近點，正常眼遠點無限遠處，近點在10—15cm。當物體距離眼睛25cm時，在人眼的視網膜上造的像zui為清晰。而且看起來不易感到疲勞，這個距離叫明視距離。顯微鏡的明視距離規定為25cm，就是這個道理。

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