暗場(chǎng)顯微鏡原理
要查看標(biāo)本在暗視野,一個(gè)不透明的光盤置于下方的聚光鏡,所以,*的光線是由分散在幻燈片上的對(duì)象可以達(dá)到眼(圖2)。而是通過(guò)試樣,光反映在幻燈片上的粒子。一切是可見(jiàn)的,不分膚色,通常對(duì)一個(gè)黑暗的背景明亮的白色。染色的對(duì)象往往是在看到“假色”,即反射光,是一個(gè)比對(duì)象的顏色不同的顏色。采用暗,而不是明亮的實(shí)地查看,可以得到更好的分辨率。
你不需要精密的設(shè)備來(lái)得到一個(gè)暗場(chǎng)效果,但你需要一個(gè)更高強(qiáng)度的光,因?yàn)槟闼吹降闹挥蟹瓷涔狻T诘捅堵剩ǜ哌_(dá)100倍)任何像樣的光學(xué)儀器可以成立,使光線向觀眾,而不是通過(guò)直接向觀眾對(duì)象反映。
要成立一個(gè)“暗場(chǎng)”觀看解剖顯微鏡,標(biāo)本應(yīng)放置在一個(gè)開(kāi)放,使光線只能從表面蓋玻片和幻燈片之間反映,而不是從表面下方的幻燈片。您可能需要一個(gè)獨(dú)立舉行的幻燈片。表面下方的開(kāi)放應(yīng)該是一個(gè)扁平的黑色。關(guān)閉所有內(nèi)置照明燈。著眼于一個(gè)角度向試樣的高強(qiáng)度光源,通過(guò)一個(gè)玻璃盤或jar的頂部或側(cè)面。
用復(fù)合顯微鏡,暗場(chǎng)是通過(guò)源和冷凝器之間的光路中放置一個(gè)閃動(dòng)的磁盤。可以準(zhǔn)備一個(gè)閃動(dòng)的磁盤上的廉價(jià)硬幣大小直徑等于幻燈片的寬度不等的黑色電工膠帶切割圓形件,并堅(jiān)持他們?cè)谶B續(xù)的幻燈片。圓圈應(yīng)間隔,以及除。標(biāo)本放在顯微鏡階段像往常一樣,和照明應(yīng)盡可能均勻。如果有一個(gè)在冷凝器中的光圈(對(duì)比度桿),它應(yīng)該是開(kāi)辟了廣泛的。后專注于低功耗,閃動(dòng)的磁盤的幻燈片是放置在源和冷凝器之間的光路,使其盡可能靠近冷凝器的底部,因?yàn)樗鼤?huì)去。
我將開(kāi)始與zui大的磁盤,滑動(dòng),直到它是直接在光路的中心。增加照明應(yīng)產(chǎn)生良好的暗場(chǎng)效果。要優(yōu)化,首先嘗試停止視場(chǎng)光闌,以獲得的背景和標(biāo)本之間的對(duì)比。嘗試匹配閃動(dòng)磁盤場(chǎng)直徑的大小,使磁盤的邊緣,外面的教職員領(lǐng)域 - 更小的磁盤適合于更高功率的目標(biāo)。縱向上,磁盤應(yīng)盡可能靠近冷凝器,使對(duì)比度zui大的。在配備內(nèi)置的暗場(chǎng)設(shè)備的顯微鏡,觀點(diǎn)是如此令人印象深刻,因?yàn)殚W動(dòng)的磁盤內(nèi)置冷凝器 - 非常接近和集中。經(jīng)過(guò)測(cè)試的設(shè)置這樣一個(gè)立場(chǎng)可能被操縱,以適應(yīng)在顯微鏡下的,所以不持有它的幻燈片可放置位置。東西'抓住'冷凝器和支持閃動(dòng)磁盤將是理想的。越少,學(xué)生們亂用,效果更佳。
懸浮細(xì)胞和池塘里的水樣本,看起來(lái)壯觀的暗場(chǎng)。雖然標(biāo)本可能看起來(lái)沖了出去,在明亮的領(lǐng)域缺乏細(xì)節(jié),原生生物,多細(xì)胞動(dòng)物,細(xì)胞懸浮物,藻類和其他微生物明確區(qū)分,他們的細(xì)節(jié)顯示良好。 100X,您可以很容易地看到細(xì)菌,甚至分辨一些結(jié)構(gòu)(棒,桿彎曲,螺旋,或球菌)和運(yùn)動(dòng)。非能動(dòng)菌看起來(lái)像一個(gè)黑暗的背景振動(dòng)對(duì)亮點(diǎn)。運(yùn)動(dòng)型細(xì)菌可以看出一個(gè)明確的方向移動(dòng),有時(shí)顯著加快。池塘里的水樣本中,您可能會(huì)發(fā)現(xiàn)螺旋菌volutans,一個(gè)非常大(可達(dá)0.5毫米)的運(yùn)動(dòng)型螺旋細(xì)菌的。
使用暗場(chǎng)照明時(shí)
暗場(chǎng)照明是zui容易在低放大倍率(高達(dá)100倍),雖然它可以用于任何干物鏡。任何時(shí)候,您要查看的液體樣品中的一切,碎片和所有,暗場(chǎng)是的。即使是微小的塵埃顆粒,是顯而易見(jiàn)的。暗場(chǎng)尋找懸浮細(xì)胞特別有用。暗場(chǎng)可以很容易地獲得正確的低倍率小,低對(duì)比度標(biāo)本的焦平面。
使用暗初步檢查,如酵母,細(xì)菌,小原生生物,細(xì)胞和組織成分,包括臉頰上皮細(xì)胞,葉綠體,線粒體,甚至血細(xì)胞(直徑小的色素細(xì)胞使棘手的發(fā)現(xiàn),盡管他們有時(shí)顏色)細(xì)胞懸浮液。
· 初步的調(diào)查和觀察池塘里的水樣本,干草或土壤注入,購(gòu)買原生生物或后生文化低的權(quán)力。
· 考試的淡染幻燈片。任何試樣的體積非常小的初始位置,以供日后觀看更高的功率。